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在研究开始和结束时，研究人员都对受试者进行脑部核磁共振扫描，并通过最大摄氧量检测评估其心肺耐力。同时，研究人员通过核磁共振成像技术估算大脑年龄，将大脑呈现出的生理年龄与研究对象的实际年龄进行对比。大脑预测年龄差（brain-PAD）数值越高，说明大脑看起来比实际年龄更老。此前已有研究证实，大脑预测年龄差数值较高的人，身体机能和认知能力更弱，死亡风险也更高。
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在这一背景下，通过体外 TNAP 切割实验和体内肝脏过表达 GPLD1 实验，证实 TNAP 是 GPLD1 的直接底物，GPLD1 可切割并降低老年小鼠海马血管的 TNAP 表达与活性，也就是说运动诱导的肝脏 GPLD1 能精准作用于脑血管的 TNAP 蛋白。
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